CRISPR/Cas9敲除细胞系构建
根据给定GeneID或DNA序列,设计3个敲除位点构建敲除载体,通过测序验证载体是否构建成功。在构建成功的基础上,提取去内毒素质粒并转染细胞,进行敲除效率验证。
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CRISPR/Cas9定点插入细胞系的构建
根据给定GeneID或DNA序列,需要插入的DNA序列,以及插入位置。在插入位置位置附近设计3个sgRNA以及donor并构建载体、转染细胞、单克隆的分选。最终通过测序验证是否得到插入的细胞系。